目的 :采用GC测定鸦胆子油软胶囊中油酸的含量。方法 色谱HP-INNOWAX(cross linked polyethylene glycoI.30 11X 0.53 innx 1.0 vm)-L~管柱,柱温150~240℃ ,检测器温度260~C:结果油酸在0.107 2 0.375 3 mg/mL内线性关系良好,r=0.999 8。平均加样回收率为96.37% ,RSD为1.49%。结论本法操作简便,结果可靠,重现性好,可作为该产品质量控制的方法。
鸦胆子油为苦木科植物鸦胆子的干燥成熟果实中提取得到的脂肪油,不仅用于治疗肺癌、肺癌脑转移、肝癌、胃癌和乳腺癌等多种恶性肿瘤,还可用于治疗慢性胃炎、结肠炎和尖锐湿疣等非肿瘤疾病,与化疗药合用可提高疗效,毒副反应少,很少出现恶心、呕吐、厌食、脱发、血象下降和骨髓抑制等常规化疗药的毒副反应。用其制备的制剂如乳剂已在临床上被广泛应用于治疗癌症。一般认为鸦胆子油制剂的临床作用与其含有丰富的不饱和脂肪酸特别是油酸有密切的关系,因此对含有鸦胆子油的制剂进行油酸含量测定,作为质量评价的主要指标。本文采用气相色谱法测定鸦胆子软胶囊中油酸的含量。
1 实验材料
仪器:Agilent4890D气相色谱仪(美国安捷伦仪器公司);
对照品:油酸对照品(1l1621.200301)由中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用。样品:鸦胆子油软胶囊,自制。试剂:所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件:各对照品均达到完全分离。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取油酸对照品53.62 mg,至10 mL量瓶中,加丙酮溶解并稀释至刻度,制成5.362 mg/mL对照品溶液。精密吸取5.362 mg/mL油酸对照品溶液1.0 mL至10 mL量瓶中,在65 水浴上蒸干溶剂,加0.5 moL/L氢氧化钾甲醇溶液2 mL,在65 恒温水浴中皂化15 min,待油珠完全溶解后,放冷,加三氟化硼.甲醇溶液0.5 mL,摇匀。在65 恒温水浴中甲酯化2 min,放冷,精密加入正己烷2 mL,充分振摇2 min,加饱和氯化钠适量,使溶液上浮至瓶颈,立即吸取上层有机液,用0.5 gGc测定鸦胆子油软胶囊无水硫酸钠脱水后,精密量取1 mL,定容至10n1lJ,即得。
2.3 供试品溶液的制备
分别取3批鸦胆子油软胶囊内容物各0.1 g,各平行3份,精密称定,加丙酮8 mL振摇提取3次(4、2、2 mL),提取液过滤,合并,定容至10 mL,精密量取2 mL溶液至10 mL量瓶中,按照对照品溶液的制备项下自“在65~C水浴上蒸干溶剂”起依法操作,即得。
2.4 空白试验
取鸦胆子油软胶囊中缺鸦胆子油的阴性制剂,按供试品溶液制备方法制备,测定,结果表明,在油酸色谱峰处无干扰。
2.5 线性关系的考察
精密吸取5.362 rag/mE油酸对照品溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL至10 mL量瓶中,按照对照品溶液的制备项下自“在65clC水浴上蒸干溶
剂”起依法操作制备对照品溶液,分别精密吸取对照品溶液1 ,进样,重复2次,测定峰面积
2.6 精密度试验
精密吸取5.362 rag/mE油酸对照品溶液1.4mL至10 mL量瓶中,按照对照品溶液的制备项下自“在65clC水浴上蒸干溶剂”起依法操作制备对照品溶液,精密吸取对照品溶液1 ,连续进样6次,以峰面积计算精密度,RSD为2.88%。
2.7 重复性试验
2.8 稳定性试验
取按2.7项下方法制备的供试品溶液,分别于0、2、4、8、10 h精密吸取1 ,注入气相色谱仪。求得平均峰面积,RSD为0.95%。结果表明样品
在10 h内稳定。
2.9 加样回收率试验
精密称取油酸对照品,加丙酮溶解制成8.165mg/m~ 对照品溶液。另取鸦胆子油软胶囊内容物0.05 g,平行6份,精密称定,精密加入上述对照品溶1mL(8.1650 mg/mL),按照供试品溶液的制备项下自“在65clC水浴上蒸干溶剂”起依法操作制备供试品溶液,并按含量测定方法进行测定。计算加样回收率。
2.10 样品中油酸的含量测定
照供试品溶液的制备项下操作制备样品,按上述测定方法测定鸦胆子油软胶囊中油酸的含量。