目的:观察仙芝楼灵芝孢子油软胶囊对小鼠免疫力的影响。
1 材料和方法
1.1.1样品
仙芝楼灵芝孢子油软胶囊由福建仙芝楼生物科技有限公司提供,为瓶装胶囊,内容物为褐色粉末。置于密闭、阴凉干燥处保存,供试验用。临用时用色拉油配制到所需浓度。
1.1.2主要试剂:DNFB、SRBC、豚鼠血清、印度墨汁
1.2试验动物
18~22g健康雌性昆明种小鼠120只,由中国药科大学实验动物中心提供,合格证号:苏动质字第98004号。随机分为3个试验组,分别进行炭粒廓清试验、DTH试验和血清溶血素测定试验。
1.3剂量
每个试验组分别分为40mg/kg(低剂量组)、400mg/kg(中剂量组)、1200 mg/kg(高剂量组)和空白对照组。经口每日一次给于小鼠相应剂量的受试物,空白组给于等剂量的色拉油。连续给药30 d后测量各项增强免疫力功能指标。
1.4主要仪器:TIO00型电子动物称、722型分光光度计、打孔器
1.5试验方法
1.5.1 小鼠炭粒廓清试验:各剂量组连续灌胃30d,每鼠尾静脉注入4倍稀释的印度墨汁(0.1ml/10g.bw),注入2min及10min分别从眼内眦静脉丛取血20ul,并将其加到2m10.1%Na2C03溶液中,用722型分光光度计在600nm波长处测定光密度值。
1.5.2 DNFB诱导小鼠DTH试验(耳肿胀法):
各剂量组连续灌胃30d。每鼠用剪刀将腹部毛剪去,范围约3cmX3cm,用1%DNFB溶液50ul均匀涂抹致敏。5日后用1%DNFB溶液lO u l均匀涂抹于小鼠右耳进行攻击,同时用不含DNFB的溶液10ul均匀涂抹于小鼠左耳作对照。攻击后24h颈椎脱臼处死小鼠,剪下左右耳壳,用打孔器取下直径8mm耳片,称重。左右耳片总量之差为肿胀度。同时取下小鼠脾脏、胸腺并称重,计算脏器系数。
1.5.3血清溶血素测定试验:
各剂量组连续灌胃30d。制备2 的绵羊红细胞(SRBC)悬液,每只鼠腹腔注射0.2ml进行免疫,4d后摘除眼球取血于离心管中,放置lh,200r/min离心10min,分离并收集血清。血清200倍稀释后,按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。溶血素的量以半数溶血值(HCSO)表示。
2 结果
2.1仙芝楼灵芝孢子油软胶囊对小鼠炭粒廓清作用的影响
2.2仙芝楼灵芝孢子油软胶囊对DNFB诱导小鼠DTH的影响的结果,高剂量组小鼠胸腺/体重比值与对照组比较。
2.3仙芝楼灵芝孢子油软胶囊对小鼠血清溶血素形成的影响 对照组相比较差异性显著(P<0.05)。
从目前公开发表的研究报告中可以看出灵芝多糖的免疫调节作用主要集中在以下几个方面:促进单核/巨噬细胞系统的吞噬功能、促进细胞免疫功能、调节体液免疫功能、抗过敏、抗辐射和抗免疫抑制等。仙芝楼灵芝孢子油软胶囊富含灵芝孢子经物理破壁,超临界C0萃取所得到的多糖和多肽,前期实验表明其在抗肿瘤,改善心脑血管疾病方面都要一定效果,本试验拟考察灵芝孢子油软胶囊对免疫系统的影响。
(本文节选自《灵芝孢子油软胶囊增强免疫力的研究》)