【摘要】目的:观察针灸配合中药石连饮对肥胖大鼠血清瘦素、神经肽Y含量和下丘脑神经肽Y基因表达的影响,探讨针药并用治疗单纯性肥胖的机制。方法:Wistar雄性大鼠120只,随机分为普食组及高脂组,高脂组用高脂饲料喂养16周制作肥胖大鼠模型。将造模成功的60只大鼠按随机化原则分为:针药组、西药组、模型组。针药组针刺大鼠“后三里”和“中脘”穴,接通电针仪,并灌喂中药石连饮
【关键词】肥胖;血清瘦素;瘦素受体;神经肽Y;下丘脑;针灸;石连饮
单纯性肥胖症是糖尿病、高血脂及心脑血管病等多种严重危害人体健康疾病的危险因子,不仅降低患者的生活质量,而且缩短其寿命。随着社会的发展及生活方式的改变,肥胖呈逐年上升的趋势。现代研究发现,针刺配合中药治疗,既可通过对患者机体神经、内分泌及物质代谢的影响,又可通过加速能量代谢、体脂分解以及调节人体整体机能等多种综合效应,达到减肥效果,作用持久,不易反弹。本实验通过检测针灸配合石连饮对肥胖大鼠血浆神经肽Y含量及下丘脑NPY基因表达的影响,进一步探讨针药并用治疗单纯性肥胖的作用机制。
1 实验材料及方法
1.1 实验动物分组、造模及治疗方法 见笔者前期研究《针灸配合中药对单纯性肥胖大鼠瘦素水平的影响》。
1.2 主要药品及试剂 石连饮及盐酸西布曲明胶囊;神经肽Y(NPY)放免分析试剂盒(解放军总医院科技开发中心放免所);PCR扩增试剂(上海Promega公司产品);PCR引物(由上海生工生物工程有限公司合成)。
1.3 取材 将治疗后大鼠禁食过夜,处死,取血、血浆及下丘脑等以备待测。
1.4 观测指标与方法 血清瘦素的检测应用瘦素放免分析试剂盒采用平衡法;血浆神经肽Y(NPY)的检测按放免试剂盒说明操作;神经肽Y(NPY)基因表达(NPYmRNA)的检测按试剂盒说明操作。
1.5 统计学方法 运用SPSS统汁软件对实验结果进行统计分析,数据用x±s表示。
2 实验结果
2.1 各组大鼠血浆神经肽Y的影响 见表1。
表1显示,肥胖大鼠血浆神经肽Y明显升高,与普食组比较(P<0.01)差异显著;经治疗后,针药组血浆神经肽Y明显降低,与模型组比较(P<0.01)差异显著;西药组与模型组比较(P<0.05),针药组与西药组比较(P>0.05)差异不显著。
2.2 各组大鼠下丘脑Total RNA甲醛凝胶电泳 见图1。下丘脑Total RNA丰度尚高,各样品RNA无明显降解。
2.3 反转录PCR(RT-PCR)法测定各组大鼠下丘脑NPYmRNA结果比较 见表2。
由表2可以看出,肥胖大鼠下丘脑神经肽Y基因表达显著高于正常大鼠,两者相比有显著性差异(P<0.01);经治疗后,针药组、西药组大鼠下丘脑神经肽Y基因表达降低,与模型组相比有显著性差异(P<0.01),与正常大鼠相比无明显差异(P>0.05)。
3 讨论
神经肽Y是一种主要由下丘脑分泌的生物活性多肽,由36个氨基酸组成,在体内广泛分布于中枢神经系统及外周器官,主要参与饮食、呼吸、平滑肌以及下丘脑神经内分泌功能等生理过程的调节,又能抑制机体产热过程,因而在单纯性肥胖病的发病过程中起重要作用。研究表明,瘦素可作用于下丘脑的瘦素受体,降低下丘脑神经肽Y的表达并抑制其分泌,出现食欲降低,减少能量摄取。由此可见,下丘脑组织中产生的瘦素和神经肽Y相互作用,构成了调节体内脂肪储积和消耗的环路,在正常情况下两者的相互协调,能保持身体质量的平衡,不会引起机体脂肪组织的储积,而当两者发生调节失常时,就会引起肥胖。笔者研究发现:经针药并用治疗后的大鼠下丘脑瘦素水平明显上升,外周血瘦素水平明显下降,说明针药并用的治疗方式能有效提高中枢神经系统中瘦素的含量,并显著降低外周血中瘦素的含量及瘦素抵抗,并且瘦素水平的上升又有效地抑制下丘脑神经肽Y基因表达,使神经肽Y在下丘脑和外周血中的含量明显降低。因此得出,针药并用的治疗方式可通过调节下丘脑瘦素的分泌率,以改善瘦素抵抗及外周血浆中的神经肽Y含量,通过重新调整神经肽Y和瘦素的平衡,进而达到减肥的目的。
(韩海荣,刘德全,针药并用对单纯性肥胖大鼠血清瘦素及下丘脑NPY基因表达的影响[J]针灸临床杂志2012年第28卷第5期:71-73)