他克莫司胶囊(FK506)是一种强效免疫抑制剂,是从链霉菌的代谢产物中分离出的一种夭环内酯类化合物,药效强度是
环孢素A(CsA)的100倍。笔者采用反相高效液相色谱法(RP—HPLC法)测定他克莫司胶囊中他克莫司胶囊的含量,试验结果表明,该方法操作简便,结果准确、可靠。
Agilent1 100型高效液相色谱仪。他克莫司胶囊(规格为1.0mg/粒,批号为20050316,20050318,20050320),他克莫司胶囊对照品(纯度为98.2% ,HPLC面积归一化法),均由浙江海特药业有限公司提供;乙腈为色谱纯;水为重蒸水;其余试剂均为分析纯。
精密称取他克莫司对照品25 mg,置50mL量瓶中,加乙腈溶解并稀释至刻度,摇匀即得质量浓度为0.5 mg/mL的对照品溶液。精密称取本品内容物适量(相当于他克莫司2.5 mg),置10 mL量瓶中,精密加入乙腈5 mL,充分振摇(必要时超声助溶),使他克莫司胶囊完全溶解,取高速离心处理的上清液作为供试品溶液。他克莫司在含水溶液中易发生哌啶羧酸部位的顺反异构,形成3种互变构体 ,故取他克莫司胶囊对照品约25 ,置50 mL量瓶中,加乙腈一水(1:1)溶解并稀释至刻度,放置2 h,作为系统适用性试验溶液。
结果表明,他克莫司胶囊质量浓度在范围内与峰面积线性关系良好。
结构类似物的分离:取他克莫司和
西罗莫司的混合溶液,照上述色谱条件测定,结果西罗莫司在他克莫司之后出峰,与他克莫司胶囊分离良好。
(本文节选自《反相高效液相色谱法测定他克莫司胶囊的含量》)