"胸腺五肽"于1985年在意大利上市。国内海南中和药物研究所经过十年的努力完成合成工艺、药理及急性毒性试验及临床验证,并取得国家卫生部颁发的新药证书。1997年在国内外全面上市,是我国第一个自行研制开发并经国家卫生部批准的人工合成肽类新药。在实验研究和临床应用中,和信注射用"胸腺五肽"均显示出具有调节免疫系统的作用,在多种免疫功能紊乱的状况下,无论是抑制还是超敏,都能通过促进或抑制的双向调节作用使免疫功能趋于正常,并能有效地纠正和防止各种情况下的细胞免疫功能缺损,和信注射用胸腺五肽是一种用途广泛并且疗效显著的免疫功能调节药物。
高效液相色谱仪测定和信注射用胸腺五肽含量的方法学研究
1 仪器与试剂
Vafian型高效液相色谱仪,UV一1601型紫外可见分光光度计,德国赛多利斯(Sa~ofius)电子分析天平,PHS一25型pH计(上海精密科学仪器有限公司),和信注射用胸腺五肽,甲醇为色谱纯,水为高纯水,其它试剂均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱:OPH RPODS C18(5txm,4.6mmx250mm);流动相:50mmol-L一磷酸盐缓冲液(以氢氧化钠调节pH在7.0左右)一甲醇(90:10);流速:1.0mI rain~;柱温:室温;检测波长:275nm;进样最:20lxL。结果表明,和信注射用胸腺五肽峰与相邻杂质峰的分离度大于1.5.理论板数按和信注射用胸腺五肽峰计算,应不低于1 200。
方法:运用高效液相色谱仪对TP5的含量进行测定.依据获得的色谱图来建立各试液浓度与峰面积之间的线性关系,并确讧利用其线性关系来测定TP5含量的可行性。在实验中通过对重复性、精密度、稳定性、回收率的测定来保证方法的准确性。结果:应用高效液相色谱法测定TP5的含量,其重复性、精密度、稳定性、回收率、线性范围试验,RSD<2% .r>0.999,线性关系良好。结论:高效液相色谱法方法准确、灵敏、专属性强,可作为和信注射用胸腺五肽的含量测定方法。
精密称取和信注射用胸腺五肽样品5.0mg(批号:20071103),取两次样,分别加入流动相溶解并稀释,精密量取2O L进样,各进两针:另取已知含量为98.8% 的和信注射用胸腺五肽对照品5.0mg(批号:20050917),同法测定。由色谱图可知,在相同色谱条件下保留时间一致,则可确定为同一物质。