田国保, 崔建军, 田地, 北京大学第一医院感染疾病科病毒研究室北京市 100034
曾争, 陆海英, 北京大学第一医院感染疾病科 北京市 100034
国家自然科学基金资助项目, No.30671855
田国保, 北京大学第一医院感染疾病科硕士生, 主要从事与乙型肝炎病毒感染相关的易感基因或拮抗基因的研究。
通讯作者: 曾争, 100034, 北京市, 北京大学第一医院感染疾病科。 zeng@bjmu.edu.cn
电话: 010-66551799
收稿日期: 2006-11-13 接受日期: 2006-12-08
A meta-analysis on the relationship between tumor necrosis factor-α promoter polymorphisms and chronic hepatitis B virus infection
Guo-Bao Tian, Zheng Zeng, Hai-Ying Lu, Jian-Jun Cui, Di Tian
Guo-Bao Tian, Jian-Jun Cui, Di Tian, Laboratory of Virology, Department of Infectious Diseases, the First Hospital of Peking University, Beijing 100034, China
Zheng Zeng, Hai-Ying Lu, Department of Infectious Diseases, the First Hospital of Peking University, Beijing 100034, China
Supported by National Natural Science Foundation of China, No. 30671855
Correspondence to: Zheng Zeng, Department of Infectious Diseases, the First Hospital of Peking University, Beijing 100034, China. zeng@bjmu.edu.cn
Received: 2006-11-13 Accepted: 2006-12-08
Abstract
AIM: To investigate the relationship between the polymorphisms of tumor necrosis factor-a (TNF-a) gene promoter and hepatitis B virus (HBV) infection.
METHODS: A total of 18 case-control studies were indexed from PubMed, Embase and CNKI database, and meta-analysis and meta-regression analysis were performed to explore the relationship between the polymorphisms of TNF-a gene promoter and HBV infection as well as the differences between each study.
RESULTS: The frequency of genotype (TNF-a-308A/G and A/A) was significantly higher in spontaneously recovered group (904 controls) as compared with that in persistent HBV infection group (2303 cases) in Asian population (Mongoloid) (P = 0.001)。 In European population (Caucasian), the frequency of genotype (TNF-a-238A/G and A/A) was slightly higher in persistent HBV infection group (256 cases) as compared with that in spontaneously recovered group (195 controls) (P = 0.07)。 The ethnicity, sample size, genotyping procedure and geographical location were the influential factors in the case-control study, and the estimated between-study variance was reduced by 0.236.
CONCLUSION: The presence of the genotype (TNF-a-238A/G and A/A) may be associated with persistent HBV infection, while the genotype (TNF-a-308A/G and A/A) may be associated with HBV clearance. The ethnicity, sample size, genotyping procedure and geographical location are factors influencing the results of case-control study.
Key Words: Tumor necrosis factor-a; Polymorphism; Hepatitis B virus; Meta-analysis
Tian GB, Zeng Z, Lu HY, Cui JJ, Tian D. A meta-analysis on the relationship between tumor necrosis factor-a promoter polymorphisms and chronic hepatitis B virus infection. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2007;15(6):580-584
摘要
目的: 探讨肿瘤坏死因子a(TNF-a)基因启动子区多态性与乙型肝炎病毒(HBV)持续感染或清除的关系。?
方法:通过检索PubMed、Embase以及CNKI共纳入18项病例对照研究, 采用荟萃分析方法研究TNF-a基因启动子区基因多态性与HBV持续感染或清除的关系, 以及采用荟萃回归分析不同研究之间存在异质性的原因。
结果: 亚洲人群(蒙古人种)中自然痊愈组(904例)-308G/A位点的基因型(GA+AA)频率显著高于持续HBV感染组(2303例)(P = 0.001), 而欧洲人(高加索人种)中持续HBV感染组(256例)-238G/A位点的基因型(GA+AA)频率略高于自然痊愈组(195例)(P = 0.07), 样本量、种族、地区以及研究方法均为影响不同研究之间异质性的因素(P<0.05), 使研究之间总变异效应降低了约0.236.
结论:TNF-a-308G/A位点多态性可能与感染HBV后的清除有关, 而-238G/A位点多态性可能与HBV的持续感染有关, 并且样本量、种族、地区以及研究方法因素均可能影响病例对照研究的结果。
关键词: 肿瘤坏死因子a; 基因多态性; 乙型肝炎病毒; 荟萃分析
田国保, 曾争, 陆海英, 崔建军, 田地。 肿瘤坏死因子a基因启动子区多态性与乙型肝炎病毒感染相关性的荟萃分析。
引言
肿瘤坏死因子a(TNF-a)作为参与非细胞毒性抗病毒机制中的一种细胞因子, 具有介导多向性炎症反应和免疫调节等生物学作用。 其基因位于白细胞相关抗原(HLA)Ⅲ类基因簇内, 在其启动子区存在5个典型的单核苷酸多态性(SNPs)位点, 分别是-238G/A、-308G/A、-857C/T、-863C/A和-1031T/C, 关于TNF-a基因多态性与乙型肝炎病毒(HBV)感染宿主易感性方面近些年来一直是研究的热点, 然而可能由于选择的人群(种族)和样本量等的原因, 研究的结论不尽一致甚至相反[1-2], 本文运用荟萃分析(meta-analysis)的方法针对-238G/A和-308G/A两个位点(其他位点研究结果很少), 对以往的资料进行初步分析, 为以后进一步的研究提供参考。?
1 材料和方法
1.1 材料 病例组即慢性HBV感染组(chronic HBV infection)包括携带者、慢性乙型肝炎、肝硬化以及肝癌, 其诊断标准符合国内《乙型肝炎防治指南》(2000年西安会议)或国际标准(亚太肝病会和欧洲肝病会制订标准); 根据文献进行再分组, 对照组分为感染后自然痊愈组(spontaneously recovered, SR: HBsAb阳性)和正常健康人组(healthy group, HBsAb可能阳性或阴性); 研究为病例-对照研究(case-control), 包括前瞻性研究和回顾性研究, 研究位点至少包括启动子区-238G/A和-308G/A位点中的一个。 病例组的入选要排除合并HAV、HCV、HIV等病毒的感染以及其他肝胆系统疾病, 病例组样本要能够排除急性感染病例。
检索关于TNF-a基因启动子区多态性与HBV感染相关的所有病例-对照研究, 两位评价者单独检索并交叉核对。 检索PubMed及Embase(1990/2006-10): 检索词为“tumor necrosis factor”、“hepatitis B virus”和“polymorphism”。 检索中国期刊全文专题数据库(CNKI, 1994/2006-10): 检索词为“肿瘤坏死因子a”和“乙型肝炎病毒”或“多态性”。 仔细查阅所有检出文献的参考文献作为补充, 并与部分作者联系, 以进一步取得全文及更完整的资料, 共有18项研究纳入本研究。 排除的研究包括综述性文章2篇、非病例-对照研究1篇, 重复性的文章2篇, 统计时有不同的文章重复样本的研究时注意排除重复数据等。
1.2 方法 用统一的表格提取所选研究的资料, 包括文章的作者及发表年代、所选择人群(国别和地区分布)、对照组和病例组(所选对象、平均年龄、性别比例及样本量)、基因型检测方法及频数以及发表的杂志。 纳入本荟萃分析研究的人口学统计资料见表1.
统计学处理 参考Ye et al[3]研究基因组多态性荟萃分析的方法, 以类似遗传共显性模型为标准, 针对-238G/A和-308G/A两个位点(G/A+AA为效应变量), 对于病例-对照组之间的差异比(odds ratio, OR)根据研究之间有无异质性分别采用随机效应模型或固定效应模型(RevMan4.2软件)分析, OR以95%置信区间(confidence interval, CI)表示, 以c2检验分析研究间的异质性, P<0.05表示异质性有显著统计学意义; 同时以log OR值为效应变量, 以总样本量, 研究方法, 对照组来源(正常健康或者自然痊愈组对照), 种族(蒙古人以及高加索人)以及地区(东南亚以及欧洲)为D-同变量(由于样本年龄以及性别比不是单个研究对象资料, 故无法统计), 采用State8.0软件中荟萃回归分析, 对异质性的原因进行初步分析。
2 结果
以对照组(自然痊愈组或正常健康组)的不同进行分组, 同时以种族(蒙古人种或高加索人种)的不同进行亚组分析, 结果如下:
2.1 慢性HBV感染组与自然痊愈组比较 TNF-a-238G/A位点: 纳入本荟萃分析共6项研究, 异质性检验有统计学意义(c2 = 16.71, P<0.05), 随机效应模型分析在慢性HBV携带组与自然痊愈组之间, -238G/A位点的基因型(GA+AA)频率差异无统计学意义(总效应方差Z = 1.38, P = 0.17>0.05, 图1)。 荟萃亚组和回归分析后提示, 样本量、种族、地区、以及研究方法均为为影响研究之间异质性的因素(P<0.05), 使组间总变异效应降低约0.236.
TNF-a-308G/A位点:纳入本荟萃分析共7项研究, 异质性检验无统计学意义(c2 = 6.27, P = 0.39>0.05), 亚组分析采用固定效应模型(研究之间无异质性)结果提示, 亚洲人群(蒙古人种)中自然痊愈组-308G/A位点的基因型(GA+AA)频率显著高于慢性HBV携带组, 差异有统计学意义(总效应方差Z = 3.25, P = 0.001<0.05); 而欧洲人群(高加索人种)中两组之间差异无统计学意义(总效应方差Z = 0.78, P = 0.44>0.05)(图2)。
2.2 慢性HBV感染组与正常健康组比较 TNF-a-238G/A位点: 纳入本荟萃分析共3项研究, 异质性检验无统计学意义(c2 = 1.01, P>0.05), 亚组分析采用固定效应模型结果提示, 亚洲人群(蒙古人种)中慢性HBV携带组与正常健康组之间-238G/A位点的基因型(GA+AA)频率差异无统计学意义(总效应方差Z = 1.45, P = 0.15>0.05)(图3)。
TNF-a-308G/A位点: 纳入本荟萃分析共8项研究, 异质性检验有统计学意义(c2=16.83, P<0.05), 亚组分析采用随机效应模型结果提示, 亚洲人群(蒙古人种)中慢性HBV携带组与正常健康组之间-308G/A位点的基因型(GA+AA)频率差异无统计学意义(总效应方差Z=0.95, P = 0.34>0.05, 图4)。 荟萃回归分析后提示, 样本量并不是影响该组研究之间异质性的因素(P>0.05), 可能跟对照组选择本身有关系。
3 讨论
TNF-a是一种主要有单核/巨噬细胞系分泌的、能够介导多种炎症反应和免疫调节反应的细胞因子, 体内适量水平的TNF-a在维持机体内环境的稳定以及抵抗外来微生物入侵中发挥重要作用, 其中TNF-a可以直接通过激活NF-kB后破坏HBV壳体的完整性而起到抑制HBV复制的作用。
研究表明TNF-a表达水平除了与机体本身免疫系统的活化水平等有关外, 宿主本身即TNF-a启动子区基因多态性也可能通过影响其转录活性而使表达水平不同。 其中, Gonzalez et al[4]研究表明TNF-a启动子区-308位核苷酸G被A替换后, TNF-a基因转录效率显著提高, 并且Louis et al[5], 发现TNF-a-308A等位基因携带者TNF-a全血中的表达水平比G等位基因纯合子高, 其原因一方面可能与转录因子复合物更易与TNF-a-308A等位基因结合有关(尽管G等位基因和A等位基因均可与转录因子复合物结合)[6]; 另一方面可能与激活蛋白2(Activating protein2, AP-2)和TNF-a-308G等位基因的结合(而不与A等位基因结合)后抑制其启动子活性有关[7].
TNF-a基因启动子区多态性与慢性HBV感染相关的研究一直是个热点。 早先, 德国学者Hohler et al[8]研究发现, -238G/A和-308G/A两个位点的基因组多态性与HBV感染后清除有关, 而近来日本学者Miyazoe et al[9]的研究提示两者之间并无相关; 但是可能由于两者之间选择的人群以及对照组等并不一致所致, 通过对以往研究按对照组不同以及人种不同亚组荟萃分析后, 结果表明仅亚洲人群(蒙古人种)中自然痊愈组-308G/A位点的基因型(GA+AA)频率显著高于慢性HBV携带组, 从而提示TNF-a-308G/A位点多态性可能与感染HBV后的清除有关, 而仅欧洲人(高加索人种)中慢性HBV携带组-238G/A位点的基因型(GA+AA)频率略高于自然痊愈组(P = 0.07), 提示-238G/A位点多态性可能与HBV的持续感染有关, 亚组分析和荟萃回归分析结果提示样本量、种族、地区以及研究方法均为影响不同研究之间异质性的因素。 同时病例组与正常健康组的分析结果提示各研究之间异质性较大, 并且以上所述因素均不能很好解释不同研究之间存在异质性的原因, 其中主要是与样本量大小、对照组选择相关, 从而提示以正常健康组作为对照, 研究遗传因素对HBV感染后的结局的影响不但因为是否接触过病原(如HBV)是感染性疾病遗传相关分析的一个重要前提, 而且正常健康组人群分层并不严格, 会受到混杂因素的影响(如种族, 民族, 是否有过HBV感染等)。
总之, 除了环境因素、病原体(基因型、亚型和准种等)以及感染时宿主的年龄等外, 复杂的遗传因素(包括种族、民族等)也是影响HBV感染后结局的重要因素, 因此, 我们应该在尽可能控制以上所述的混杂因素后, 进行病例对照的前瞻性研究, 收集大样本、数据以及病历资料, 系统研究TNF-a以及其他可能相关基因多态性与慢性HBV感染的关系, 为进一步的疾病易感诊断、早期预防和个体化治疗打下基础。
4 参考文献
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