癫痫康胶囊是由党参、白术、茯苓、陈皮、制半夏、炙甘草、胆南星、全蝎、僵蚕等药经提取制成的纯中药制剂;具有补脾益气,祛痰化湿,开窍定痫之功效,用于治疗脾虚痰湿之癫痫病。临床研究证实该药对癫痫病具有较好的治疗效果。我们应用硫酸锌所致家兔癫痫模型对癫痫康胶囊进行了药理研究。
1 试验材料
1.1 试验样品 癫痫康胶囊,批号:20010312;给药前,将癫痫康胶囊用蒸馏水配置成23.1%、11.5%和5.75%(V/V)的液体。
1.2 试验动物 健康成年雄性家兔49只,体重2.0~2.5kg。
1.3 饲养条件 温度(22±2)℃,湿度(50±10)%,光照12h•日-1,排气通风2次/日,单性分笼饲养,饲料为家兔全价营养饲料和青饲料。
1.4 试验仪器 多导生理记录仪(日本光电公司);721分光光度计(上海)。
1.5 对照药物:苯妥英钠片(江苏盐城制药有限公司,批号20020105),给药前,用蒸馏水将3片配置成100mL。
1.6 其它材料 硫酸锌(广州化学试剂厂,批号20011102-1),使用前用蒸馏水配置成2.0% 的溶液。
2 试验方法
2.1 动物分组和给药 动物依体重随机分层均分为5组:
(1)癫痫康胶囊3.00g•kg-1;(2)癫痫康胶囊1.50g•kg-1;(3)癫痫康胶囊0.75g•kg-1;(4)苯妥英钠30mg•kg-1;(5)蒸馏水10.0g•kg-1。
每日插胃管ig给药1次,给药容量为10.0mL•kg ;
2.2 动物手术 动物给药14d后在戊巴比妥钠25mg•kg ip麻醉下实施手术,并辅以2%普鲁卡因局部麻醉。将家兔头部固定在立体定位仪上,无菌条件下暴露颅骨,依照Sawyer图谱在P4,LL4.5,LR4.5,H6处置入外径为1.0mm 的聚乙烯塑料管(内经不锈钢针导引),用以置入记录海马放电的电极和注射药物。注射药物内管直径为0.6ram,长7.5mm,记录海马放电的电极为外周绝缘的银丝(直径0.5mm,长7.5mm),仅在实验时置入。此外,在A10,P10,LL3,RL3处分别用骨钻开4个直径为lmm的小孔,保护硬脑膜的完整性,同时置入4个记录ECoG的不锈钢电极,以牙托粉固定。术后肌肉注射青霉素10万单位/只。
2.3 试验观察和EHG记录 术后24h再次给药,给药后20min进行实验观察。首先引导正常的EHG,扫描速度200msec/格,放大倍数100 uv/格,高频滤波30Hz。记录时间1.5min。结果描记在日本光电公司生产的多导电生理记录仪上。而后将注射药物内管经塑料管插入到海马区域,由内管直接缓注射时间为5min,注射结束后针管保留5min后取出,分别在注射ZnSO 前(正常)、注射ZnSO 结束后30min、1h、2h、4h、8h和24h(24h记录前30min再次给药),记录双侧EHG。同时按照癫痫发作的行为表现观察及记录动物行为(将动物行为由轻至重分为6级。0级:安静;1级:口或面部抽动;2级:点头,转圈,湿狗反应;3级:前肢阵挛,咀嚼流涎;4级:直立阵挛;5级:立起和跌倒交替出现;6级:发作过度导致死亡)。试验数据进行统计学分析,组间进行t检验。