目的:建立雏A酸片溶出度的测定方法。
方法:以磷酸盐缓冲液(pH=7.4)一异丙醇(75:25)为溶剂,转速为100 r/rain,照分光光度法,在339 tim的波长处泖l定吸收度。
结果:维A酸在0.8—8、1 I~g/mL范围内,吸收度与浓度呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均回收率为99.7% ,RSD=0.3%(n=6),每片的溶出量均不少于标示量的80% 。
结论:该方法准确、可行、回收率好。
维A酸为细胞诱导分化药,主要影响骨的生长和上皮代谢,有促进上皮细胞增长分化、角质溶解等作用。2000年版《中国药典(二部)>
维A酸片标准中,溶出度测定用溶媒为聚山梨酯80一水,由于溶出介质选择欠佳,造成测定结果误差较大。作者根据维A酸的溶解特性,选择磷酸盐缓冲液(pH=7.4)一异丙醇(75:25)为溶剂进行了试验,结果证明该方法准确可行,回收率好。
1 仪器与试药
ZRS一8G型智能溶出试验仪(天津大学无线电厂),uv一2201型分光光度计(日本岛津)。维A酸对照品(中国生物制品检定所提供);维A酸片(山东良福制药有限公司,批号:020401,020301,020601);所用试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择
精密称取维A酸对照品适量,加异丙醇少量使溶解,用磷酸盐缓冲液(pH=7.4)一异丙醇(75:25)稀释制成每1 mL中约含4 g的溶液。照分光光度法 1,在400~220 l''lm的波长范围内扫描,结果在339 am波长处有最大吸收。另取相当于1片处方量的辅料,加入上述溶剂500 mL中,振摇,滤过,取滤液,同法测定,在339 nm波长处几乎无吸收,故选择339 nm作为维A酸片溶出度的测定波长。
2.2 线性关系考察
精密称取维A酸对照品约20 mg,精密称定,置100 mL量瓶中,加异丙醇适量,振摇使溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,4.0 mL,分别置100 mL量瓶中,用磷酸盐缓冲液(pH;7.4)一异丙醇(75:25)稀释至刻度,摇匀,在339 Dill波长处分别测定吸收度。以吸收度(A)对浓度(c)进行线性回归,得回归方程为:A=0.164 4C一0.007 6,r=0.999 7。结果表明,维A酸在0.8—8.1~g/mL范围内,吸收度与浓度呈良好的线性关系。
2.3 溶液稳定性考察
取2.2项下的对照品溶液(浓度为4.04 p~/mL),在室温条件下,分别于0,1,2,4,6 h在339nln的波长处测定吸收度。结果表明,在避光条件下,6 h内溶液吸收度几乎无变化;在未避光条件下,1 h内吸收度即有下降。因此,操作应避光。
2.4 回收率试验
精密称取维A酸对照品适量(约20 mg),加入处方量的辅料,分别置100 mL量瓶中,加异丙醇适量,振摇使维A酸溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2 mL,置100 mL量瓶中,用磷酸盐缓冲液(pH=7.4)一异丙醇(75:25)稀释至刻度,摇匀,照分光光度法,在339 nm波长处分别测定吸收度。另精密称取维A酸对照品适量,加异丙醇少量使溶解,用磷酸盐缓冲液(pH:7.4)一异丙醇(75:25)稀释制成每1 mL中约含4 的溶液,同法测定,计算回收率。测得平均回收率为99.7%(,I=6),RSD为0.3%。
2.5 测定转速的选择
取本品,照溶出度测定法第二法,以磷酸盐缓冲液(pH:7.4)一异丙醇(75:25)900mL为溶剂,转速分别为75 r/rain和100 r/rain,分别在5,15,30,45,60 rain时取溶液5 mL,滤过,并即时在操作容器中补充上述溶剂5 mL,精密量取续滤液2 mL,照溶出度测定项下方法测定,计算出每片在不同时间的溶出量。
可见在相应时间点,100 r/min溶出速率比75 r/rain的
快,因此确定转速为100 r/min。
2.6 均一性考察
不同转速下的溶出结果(% ,n=6取本品,照溶出度测定法第二法,以嗣擎酸盐缓冲液(pa=7.4)一异丙醇(75:25)900 mL为溶剂,转速为100 r/rain,依法操作。