除脂生发片由当归、川芎、牡丹皮、何首鸟、白鲜皮等十五味药组成,具有滋阴,养血,祛风,活络,止痒,除油脂等功效。除脂生发片用于
脂溢性脱发,头皮瘙痒,落屑,油脂分泌过多症。其中牡丹皮中主要有效成分为丹皮酚,本品收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十册,该标准中无含量测定方法,为了控制产品质量,保证疗效,我们建立除脂生发片制剂中丹皮酚的含量测定方法。
仪器与试药:LC一2010A高效液相色谱仪(日本岛津);丹皮酚对照品(中国药品生物制品检定所,批号:0708—9704);除脂生发片(吉林市涌源药业有限公司,批号:050301、050302、050303;甲醇为色谱纯;水为纯化水;其它试剂均为分析纯。
方法与结果:色谱条件色谱柱:Hypeysil BDS Cl8(4.6×250 mm,5p.m);流动相:水一甲醇(28:72);流速0.8 mL•min ;柱温:室温;检测波长:274 nml理论板数按丹皮酚计算应不低于3000,分离度为5.68。
对照品溶液的制备:取丹皮酚对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含50 g的溶液,作为对照品溶液。
供试品溶液的制备:取重量差异项下的除脂生发片,取约1.0 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50 mL,称定重量,超声处理30分钟,取出,放置室温,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,弃去初滤液,取续滤液,作为供试品溶液。
阴性对照溶液的制备:取除牡丹皮以外的全部成分,按处方工艺制成溶液,再按供试品溶液制备方法制成阴性对照液。
重复性试验:取同一批号除脂生发片供试品5份,分别按样品测定方法制备供试品溶液,在给定的色谱条件下进行测定,外标峰面积法计算丹皮酚的含量,独立测定5次,结果平均含量0.3802 mg /片,RSD 为1.01 。
加样回收率试验:精密称取已知含量的供试品0.5 g(批号:050301,含量0.38 mg/片)6份,分别精密加人对照品溶液(0.129 mg•mL )10 mL,依法测定,计算回收率。
样品测定:取除脂生发片供试品溶液,按本文色谱条件测定,以外标峰面积法计算供试品中丹皮酚的含量,共测定3批样品。
(本文节选自《HPLC法测定除脂生发片中丹皮酚的含量》)