益视由党参、当归、五味子(蒸)等l4味中药经加工制成,具有滋肾养肝、键脾益气、调节视力的功能;用于肾肝不足、气血亏虚引起的青少年
近视及视力疲劳。方中党参,当归,五味子,制何首乌,厚朴(姜制)等用量大,为主要药味。原标准没有含量测定项。为了有效控制
益视颗粒的质量,保证临床疗效,作者对益视颗粒剂进行含量测定研究,采用新的测定波长及样品制备法,具有操作简便、回收率高、杂质干扰少的优点。
仪器与试药:高效液相色谱仪(大连依利特P200 11高压恒流泵、大连依利特UV200 11紫外可变波长检测器、千谱色谱工作站),Hypersil BDS Cl8色谱柱(4.6 intn×2O0intn,5 tan);厚朴酚对照品(中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号o729.98cI5);益视颗粒剂由江西聚仁堂药业股份有限责任公司提供;流动相所用溶剂为色谱纯,其他试剂为分析纯。
标准曲线的制备精密称取厚朴酚对照品适量,加甲醇溶解并制成每l mL中含0.151 2 rag的溶液。精密量取0.3,0.6,1.0,1.5,2.0 mL分别置于l0 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得厚朴酚系列对照品溶液。分别精密量取上述对照品溶液l0,在上述色谱条件下测定峰面积,以峰面积为纵坐标,对照品进样量为横坐标,绘制标准曲线。
供试品的制备本品l袋,取出内容物研成细粉,过100目筛。取约5 g,精密称定,加10 mL溶解并转移至分液漏斗中,加氯仿萃取4次,每次15 mL,合并氯仿萃取液,置于另一分液漏斗中。加30%甲醇溶液5 mL,轻轻振摇,静置。分取氯仿液,上层水溶液用氯仿洗涤1次,合并氯仿液层及氯仿洗涤液,挥去溶剂,残渣加甲醇使溶解并转移至25 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,过微孔滤膜(0.45 tan),即得。
检测波长的选择 曾以藿香正气水含量测定方为参考,采用其测定波长294姗,但是样品中的杂质峰干扰大,峰面积值少,重复性差。通过摸索发现在483 nm处测定厚朴酚时,其峰面积值大,杂质峰干扰少,因此采用483 nln。提取溶剂的选择益视颗粒剂水溶性强,易吸潮,因此先用水将其溶解,再用有机溶剂萃取,作者曾试用了石油醚、乙醚、醋酸乙酯、氯仿等萃取溶剂,结果氯仿萃取液厚朴酚含量最高。
纯化溶剂的选择氯仿萃取液中杂质多,对色谱柱损伤大。作者曾采用了不同的溶剂(水,10%甲醇,30% 甲醇,50% 甲醇)纯化氯仿萃取液,结果3o%甲醇溶液处理,杂质除去多且厚朴酚损失最少,因此用30%甲醇纯化,并用氯仿回洗。