欧宁是一种重要的免疫调节剂,对多种疾病都有较好的疗效。近年来随着国内外学者研究的深入,已经有了很多关于欧宁(
注射用胸腺五肽)的研究报道。但是至今大部分研究只是针对欧宁(注射用胸腺五肽)生物学作用和治疗作用,几乎没有关于含量测定特别是体内药物分析方面的文献。 本文是关于欧宁(注射用胸腺五肽)的分析方法及药代动力学研究,目的在于建立欧宁(注射用胸腺五肽)从原料药、制剂到生物体内这整个系统的药物分析方法。
欧宁的分析方法及药代动力学研究主要从以下四个方面进行::
第一:尝试使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶过滤层析柱色谱两种方法进行欧宁(注射用胸腺五肽)原料药的定性方法研究。经过多次实验,最终选择了凝胶过滤层析柱色谱法。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳两层凝胶系统和三层凝胶系统均不能得到胸腺五肽样品带。胸腺五肽的凝胶过滤层析柱色谱保留时间为21min左右。
第二:考察紫外分光光度法、荧光分析法、分子排阻高效液相色谱法、凝胶过滤层析柱色谱法等四种方法对欧宁(注射用胸腺五肽)的定量分析,建立了分析方法并进行方法学的验证。经过比较,发现四种方法均可用来定量分析胸腺五肽,但是各自有其适用范围和优缺点。
第三:用凝胶过滤层析柱色谱法和毛细管电泳法进行欧宁(注射用胸腺五肽)血药浓度测定的体外模拟实验,分别对小鼠和家兔血清中的胸腺五肽进行了分离。结果凝胶过滤层析柱色谱不能将血清与胸腺五肽分开,用盐析和有机溶剂沉淀的方法对样品进行前处理也不能实现分离。使用毛细管电泳法检测欧宁血药浓度时,pH7.4Tris-磷酸缓冲液对小鼠血清混合物的分离效果更好,pH3.0磷酸盐缓冲液对家兔血清混合物的分离效果较佳。
第四:用毛细管电泳法研究欧宁的药代动力学。实验测得的小鼠体内静注欧宁消除半衰期为94.4s和109.7s,与文献报道的人体内欧宁消除半衰期30s有一定差别。但是作为欧宁的药代动力学研究方法,毛细管电泳法是可行的,在进一步深入研究时可以使用本法。
欧宁为免疫双向调节药。具有诱导和促进T淋巴及其亚群分化、成熟和活化的功能,调节T淋巴细胞的比例,使CD4+/CDa+趋于正常;调节和增强人体细胞免疫功能的作用,能促使有丝分裂原激活后的外周血中的T淋巴细胞成熟,增加T细胞在各种抗原或致有丝分裂原激活后各种淋巴因子的分泌,增加T细胞上淋巴因子受体的水平。