谢建兴, 王峻, 陈铭, 刘鸿( 广州中医药大学第一附属医院泌尿外科,广东广州510405)
摘要:【目的】观察龟龄集胶囊对棉子油所致少精症模型大鼠的生精作用及其对性激素水平的影响。【方法】以灌服棉子油法复制少精症大鼠模型,以五子衍宗丸( 剂量为
关键词: 龟龄集/药理学; 少精症/中药疗法; 性激素/血液; 疾病模型,动物; 大鼠
龟龄集是在“老君益寿散”的基础上加减而成的一种中药复方升炼剂。其组方集动物药( 鹿茸、海马、雀脑等) 、植物药( 人参、天冬、杜仲等) 、矿物药( 大青盐、石燕等) 28 味于一炉。文献学研究表明,谢民等[1]通过计算历代医家遗留下来的77 个抗衰老处方( “长青益寿丹”、“延龄固本丹”、“延年丸”等) 的抗衰老隶属度得出:龟龄集是以补阳为主,兼以治疗健忘而达到延缓衰老,使人延年益寿的作用。本研究观察了该方对少精症模型大鼠的生精作用及性激素水平的影响,现报道如下。
1 材料与方法
1. 1 实验动物SPF 级SD 雄性大鼠43 只( 2 月龄) ,体质量( 230 ± 20) g,由广州中医药大学实验动物中心提供( 合格证号: 0034559) 。
1. 2 药品、试剂与仪器龟龄集胶囊( 山西广誉远国药有限公司,批号: 20090331) ; 五子衍宗丸( 北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂,批号:9035078) ; 睾酮( T) 、促黄体生成激素( LH) 、促卵泡生长激素( FSH ) 试剂盒( 批号:20091025,由北京科美东雅生物技术有限公司提供) ; SN-695B 型放免Y 测量仪( 上海日环仪器一厂) ; L
1. 3 模型复制[2] 随机抽取33 只大鼠,灌服棉子油6 mL /kg,每天1 次,连续14 d,第21 天处死大鼠检测精子数和精子活力。
1. 4 动物的分组及给药正常组给予生理盐水灌胃10 mL /kg; 模型组以棉子油造模+ 生理盐水10mL /kg 灌胃; 龟龄集组以棉子油造模+ 龟龄集54mg·kg - 1·d - 1 灌胃; 五子衍宗丸组以棉子油造模+ 五子衍宗丸
1. 5 检测项目于第21 天处死大鼠,测定大鼠附睾精子数和精子密度,附睾精子数测定采用精子分析仪检测计算,以清华同方精子检测软件统计分析; 测定静脉血FSH、LH、T 含量采用放射免疫法,由广州中医药大学核医学室进行检测。
1. 6 统计方法采用SPSS 13. 0 统计软件进行处理。
2 结果
2. 1 各组对大鼠附睾精子活动数和精子密度的影响表1 结果显示: 模型组精子活动数和精子密度显著降低( 与正常组比较,均P < 0. 05) ; 龟龄集组与五子衍宗丸组均可显著升高精子数与精子密度,与模型组比较有显著性差异(P<0.05) 。
2. 2 各组对大鼠血清T、LH、FSH 含量的影响表2 结果显示: 模型组LH、FSH 含量显著升高( 与正常组比较,均P < 0. 05) 、T 含量无显著变化( P > 0. 05) ; 龟龄集组及五子衍宗组可降低LH 含量、升高FSH 含量,与模型组比较有显著性差异( 均P < 0. 05)
3 讨论
龟龄集具有助阳温肾、大补真元的功能,临床多用于命门火衰,肾精不足,气血亏损引起的阳痿、遗精、肾寒精冷、腰酸腿软等症[3]。本研究结果显示: 以灌服棉子油法能造成大鼠精子数目和密度显著减少,复制大鼠少精症模型,说明造模是成功和可行的。龟龄集胶囊能显著提高少精症大鼠的精子数目和密度,与传统的五子衍宗丸比较无显著性差异,表明两种药物对少精症的效果相仿。
睾丸的生精功能受下丘脑—腺垂体—睾丸轴内分泌激素水平的调控。在对性激素的影响上,模型组的LH 和FSH 含量均较正常组升高,有显著性差异。FSH、LH 均为垂体分泌的糖蛋白类激素,FSH与曲细精管的支持细胞膜受体结合,刺激性激素结合球蛋白的生成,高浓度的性激素结合球蛋白使曲细精管腔内的睾酮维持在较高水平,以促进生殖细胞分化成熟的精子[4]。说明棉子油对精子的影响可能是由于造成睾丸支持细胞—曲细精管复合体的损伤,致使支持细胞受损或功能降低,不能分泌足够的抑制素来调节FSH 浓度。龟龄集胶囊与模型组的FSH 浓度上比较有显著性差异,FSH 受支持细胞分泌的抑制素的负反馈调节,如果支持细胞病变或受损,就会引起抑制素分泌减少或缺乏,而致FSH 选择性升高[5]。此作用可能是通过反馈性增加FSH 分泌而达到提高精子数量和密度的作用,龟龄集的作用机理可能与五子衍宗丸的作用相类似。
LH主要促进睾丸间质细胞增生,刺激间质细胞合成和分泌睾酮,以供精子生成的需要。LH 可协同FSH 促进精子成熟,并与精子活动力有关。模型组LH 含量较正常组升高,有显著性差异,说明棉子油能引起LH 反应性增加,而龟龄集组和五子衍宗丸组在LH 的升高幅度上较模型组低,有显著性差异,说明此两种药物可能是通过减少LH 分泌,反馈性地抑制其过度分泌。
最近一项随机对照实验表明FSH 和LH 都能独立维持精子的发生,龟龄集的作用可能通过负反馈抑制作用而达到增加垂体FSH 分泌和降低LH分泌的目的。
五子衍宗丸可以显著提高血清中的T 含量,提示可能是通过提高T 水平来保持精子数量和密度,此作用与龟龄集比较有显著性差异,说明龟龄集并不是以提高T 水平来提高精子数量和密度的。龟龄集组T 含量与模型组比较差异无显著性意义,说明龟龄集对T 含量无明星影响,显示龟龄集生精作用可能并不是以提高睾酮来实现的。Vandekerckhove等对11 个随机对照实验进行循证分析,结果显示在改善精液参数上,没有足够的证据表明雄激素治疗是一种疗效明显的方法。同时临床研究显示:睾丸功能受损轻而未达到不可逆的程度时,血清和精液T 水平应该是不改变的。本研究结果也支持了上述观点。
总之,龟龄集能够显著提高精子数量和密度,作用与五子衍宗丸相仿。其作用机理可能是通过负反馈抑制作用而增加垂体FSH 分泌和降低LH 分泌,达到促进生殖细胞分化成成熟精子的作用。