塞隆骨,是高原特有动物高原鼢鼠的全骨风干品。是我国建国以来第一个国家级一类动物药材,其性微温、味辛咸,人肝肾经,主要功能为驱风除湿、散寒、舒筋活络、强筋健骨及增强机体抗力等。据报道,塞隆骨具有抗炎镇痛作用并能1:1替代虎骨,塞隆风湿酒试验和细胞染色体畸变试验结果均呈阴性。塞隆骨的药用价值已经受到了众多医药工作者的关注,尤其是对于
类风湿性
关节炎的治疗作用成为研究者关注的焦点。本实验室一直在进行复方塞隆胶囊骨治疗类风湿性关节的研究工作。前期的药效学实验已经充分证明复方塞隆胶囊骨对类风湿性关节炎有非常好的治疗预防效果,且具有镇痛,抗凝血等作用。为了进一步研究复方塞隆胶囊骨,为其深层次开发利用提供理论依据本实验室对复方塞隆胶囊骨的做用机制进行了初步研究。
受试药物:复方塞隆胶囊骨提取物(SLG.B)。高原鼢鼠捕于青海省海北州。复方塞隆胶囊骨提取物由本实验室提取,先分离全:复方塞隆胶囊骨提取物对卵清
白蛋白诱导小鼠免疫亢进的抑制作用 65骨,阴干,粉碎,混合取样,去离子水煎煮提取,减压浓缩,得干粉,冰箱保存备用。提取物主要成分为骨胶蛋白,蛋白含量大于75%。所得干粉溶于十倍量的水中超声溶解、离心、取上清。所得上清加无水乙醇至终浓度为50% ,静置、待沉淀完全、离心、沉淀80℃烘干得50% 部分。离心所得上清加无水乙醇至终浓度为90% ,静置、离心,沉淀部分烘干即得90%醇沉部分,此部分为本试验所用有效部位。
方法与结果:小鼠迟发性超敏反应雌性BALB/c小鼠每组8只,分5组,分别是模型组、SLG—B高、中、低剂量组和阳性对照组,造模前一天开始给药,给药量见表1。0.5%DNFB取适量DNFB溶于丙酮:橄榄油=4:1的溶剂中终浓度0.5% 。day 0:将0.5% 的DNFB溶液用枪缓慢加到BALB/C雌鼠的后脚上致敏(每只后脚2O L)。次日加强一次。初次致敏后第9 d,用20 IxL 0.4%DNFB攻击鼠左耳,内外两侧各1O L。攻击后24~ 48 h后脱颈椎处死小鼠,8 mm打孔器打耳片称重,以左右耳的差值作为肿胀度。结果见表1。测定结果以 ±s表示,采用单因素方差分析进行组间差异的比较。
复方塞隆胶囊骨提取物体内给药对OVA诱导的小鼠免疫功能的影响
试验结果:结果显示,与未免疫组小鼠相比,OVA+CFA免疫小鼠的OVA特异性细胞增殖反应,产生免疫增强型细胞因子以及产生OVA特异性抗体的能力显著提高。SLG.B体内给药21 d对OVA诱导的小鼠淋巴结及脾脏淋巴细胞的OVA特异性增殖具有抑图1 SLG.B体内给药对小鼠外周淋巴细胞OVA特异性
增殖的影响。
体内给药后,取不同组的淋巴细胞和脾细胞在体外再加抗原或不加培养时,均能产生一定量的IFN ,且给药组与对照相比能够降低细胞因子IFN的产生。IgG是血清中含量最高的抗体,在体液免疫中发挥重要作用。经SLG。B给药后小鼠血清中抗体的含量有所降低。
通过对复方塞隆胶囊骨提取物的实验研究中发现SLG.B具有很强的免疫抑制作用。在OVA小鼠免疫模型上,SLG.B体内给药能抑制OVA诱导的特异性淋巴细胞增殖反应;通过免疫磁珠法分离脾细胞中的T细胞及抗原呈递细胞(APC)进行体外培养,发现SLG—B对淋巴细胞增值的抑制作用主要是针对APC细胞的。同时观察了SLG—B对OVA小鼠脾细胞因量子IFN产生的抑制作用,结果发现SLG—B可以明显抑制小鼠腹脾细胞产生IFN一 (P<0.O5或P<0.o1)。我们的实验还发现SLG—B治疗组对OVA免疫小鼠血清中IgG抗体的产生有一定的抑制作用。说明SLG-B在免疫抑制起效过程中其作用靶点与APC及B淋巴细胞有关。
通过试验发现SLG—B主要是通过抑制APC细胞来抑制免疫亢进发生的,从而达到抑制类风湿性关节炎。因此研究APC及其产生的细胞因子有助于进一步明确SLG.B的作用机制。
参考文献:《塞隆骨提取物对卵清白蛋白诱导小鼠免疫亢进的抑制作用》 赵晓辉 岳会兰 蒋福全 邵赟 梅丽娟 陶燕铎 中国科学院西北高原生物研究所 西宁810008 中国科学院研究生院 北京100049 《天然产物研究与开发》2009年 第B05期