较强的免疫应答,刺激宿主机体产生的特异性抗体能阻断复苏因子蛋白对结核分枝杆菌(MTB)的促进作用,阻止MTB在宿主体内的复苏和复发,因此,结核杆菌复苏因子蛋白可能是预防和控制结核感染的一种新途径。证实Rpf蛋白质疫苗在小鼠试验中有很高的免疫反应,除rpfC外,均能诱导产生抗体IgG1和IgG2a、 一IFN、IL一10、IL一12、促进T细胞增殖。体液免疫和T细胞免疫显现出高度的交叉反应。复苏因子蛋白质疫苗在接种大剂量的毒力结核杆菌H37Rv小鼠中表现有明显的保护水平,在小鼠肺脏和脾脏中结核杆菌的繁殖和生存时间都受到抑制。
Radaeva TV 通过对结核病复燃的易感小鼠(I/st)模型试验发现:治疗型疫苗BCG对小鼠的结核病复燃没有保护力,但预防复燃型疫苗Rpf蛋白质家族,能诱导小鼠通过CD4 T细胞产生 一IFN,并且能减少小鼠脏器内结核菌的增殖。结核杆菌复苏因子蛋白质疫苗的这些较强的免疫保护作用,为结核杆菌复苏因子DNA疫苗的研究提供了新的思路。
我们的实验表明PcDNA3.1.RpfD质粒在转染CHO细胞后,其RpfD基因能在CHO细胞中转录,且表达复苏因子蛋白质D,我们将通过用PcDNA3.1-RpfD质粒作为疫苗分别免疫正常小鼠和感染H37Rv小鼠,检测其宿主免疫指标和抑菌指数,来证实新疫苗的可行性,为复苏因子基因疫苗的研究奠定了基础。
近年来,骨化三醇的免疫学作用越来越受到重视?。为了研究骨化三醇对小鼠异位气管移植动物模型免疫系统的作用,我们应用流式细胞仪监测移植后不同时间小鼠胸腺CD4 、CD8 淋巴细胞数量的变化,同时观察移植气管的病理改变,并研究骨化三醇与目前临床广泛应用的环孢菌素的协同性。
骨化三醇及其类似物在动物实验中证实可以有效的抑制急、慢性排斥反应,延长移植物存活时间 J。骨化三醇免疫作用中的重要方面就是调节T淋巴细胞的功能和数量。骨化三醇与细胞核内的VDR结合,阻断活化T细胞核因子(NF—AT),抑制IL一2的转录基因,使IL一2水平降低,从而抑制T淋巴细胞的激活? 。小鼠气管异位移植模型能够准确的反映肺移植术后慢性排斥的病理改变 。本试验连续监测了受体小鼠胸腺T淋巴细胞的数量变化,证实了骨化三醇对胸腺内淋巴细胞的分化有抑制作用,这种抑制作用与Csa有协同性。
骨化三醇和环孢菌素联合应用使移植气管阻塞率明显下降,有效的抑制了胸腺T淋巴细胞的增殖。其原因可能如下:骨化三醇与细胞核内的VDR结合,并阻断NF-AT,抑制IL-2的转录基因,这与环孢菌素的作用位点接近。环孢菌素也是通过下调IL-2的表达使T淋巴细胞停滞于Go/G.转换阶段。骨化三醇干扰T淋巴细胞激活主要在后IL一2受体水平,主要阻止细胞G /S周期的转化 。
本研究证明对受体小鼠胸腺内CD4 、CD8 数量的影响是骨化三醇免疫作用的重要方面。骨化三醇和环孢菌素对淋巴细胞有共同的靶器官作用。
(本文节选自《骨化三醇对小鼠异位气管移植后胸腺T细胞的影响》)