邓瑞春1,周勇2,张文生1,徐建国3,尚靖3,王旭丹2,于鲁海3
1 、北京师范大学资源学院资源药物与中药资源研究所,北京 100875;
2 、北京中医药大学 中西医结合研究所,北京 100875;
3 、新疆自治区人民医院 · 临床药学研究所,鸟鲁木齐 830001
人类白癜风是一种顽固性皮肤病,病因尚不清楚,发病机制至少涉及4种学说,即自身免疫、 神经体液因素、自身细胞毒和接触外源性物质等。近年来普遍认为自身免疫学说是白癜风的主要发生机制。驱虫斑鸠菊( V e r n o n i a a n t h e l mi n t i c a w i l l d,V W)注射液自新疆特有菊科植物驱虫斑鸠菊的种子中提取,主要成分黄酮含量为
本文进行一系列实验探讨VW对小鼠免疫功能的影响:淋 巴细胞转化试验测定小鼠脾T、B细胞增殖活性;脾细胞介导羊红细胞定量溶血分光光度法测定B细胞生成抗体活性,流式细胞法测定B细胞上 CD19表达活性;迟发型超敏反应(DTH)试验测定T细胞活性、【3H】- Td R掺入法测定T细胞分泌 IL-2活性等。然后用酶学方法研究VW对小鼠体内酪氨酸酶的作用。用半定量逆转录聚合酶链反应技术检测酪氨酸酶基因表达活性。结果表明,VW可以明显抑制小鼠体内T、B细胞的增殖反应( P<0.01) ;对绵羊红细胞 (SRBC) 诱导的正常小鼠脾脏抗体形成细胞活性、 CD19 B细胞亚类表达、小鼠DTH反应和T细胞分泌IL-2活性也具 有明显的抑制作用,这些抑制作用与药物浓度有一定的剂量效应关系。VW 还可以提高小鼠血清酪氨酸酶活性,增强酪氨酸酶基因的表达。以上结果说明,VW可抑制小鼠免疫功能,可以从转录水平增强酪氨酸酶活性,进而促进黑素合成。
国外已将Smyth line (SL) 鸡作为研究白癜风的动物模型,也是很好的人类自身免疫性白癜风的动物模型,但目前该动物模型尚未引入我国。因此我们采用了正常动物BAI.B/c小鼠作为研究对象,初步探讨VW对免疫功能以及黑素合成的影响。
近年研究发现,白癜风患者的免疫功能常出现异常,与正常人相比较,白癜风患者血清器官特异性抗体(包括抗黑素细胞的抗体)的阳性率明显增高,外周血T细胞及其亚群也有异常改变,提示白癜风可能是一种自身免疫疾病。
我们曾发现,VW在0.025
本实验中,我们进一步观察了VW对小鼠免疫功能的影响。VW3种剂量组(编者注:低剂量组 87.5mg/kg,为临床用量的5倍;中剂量组175mg/kg,为临床用量的10倍;高剂量组350mg/kg,为临床用量的20倍;正常对照组注射等剂量生理盐水。)均可明显抑制正常小鼠脾脏T、B细胞的增殖,使B细胞上CD19表达量降低;DTH受到抑制,小鼠脾T细胞分泌IL-2的活性下降。
黑素为吲哚和醌与蛋白质结合的高分子聚合物。黑素的合成必须具备以下3种基本物质:酪氨酸(制造黑素的主要原料,是蛋白质代谢的产物)、酪氨酸酶(酪氨酸转变为黑素的催化剂,为铜及蛋白质的复合物,在黑素细胞的粗面内质网中合成)、 氧 (酪氨酸必须与氧结合才能在酪氨酸酶的作用下转变为黑素) 。其中,酪氨酸酶在黑素合成过程中起关键性的限速酶作用。徐建国等报道,V W在体外可激活酪氨酸酶的活性。本研究也证明V W 3个剂量组均可明显促进小鼠血清酪氨酸酶活性,并且证明这种作用可在转录水平发生,从而加速黑素的合成。
以上结果提示,V W对白癜风的治疗作用,可能通过2方面发挥作用:一是抑制机体的免疫功能,降低机体对自身组织(如黑素细胞) 的免疫应答,从而减少自身黑素细胞的破坏;二是可促进酪氨酸酶的合成和降低其分解,促进酪氨酸的氧化,进而促进黑素的合成。