颈腰康胶囊由制马钱子、伸筋草等中药组成,具有舒筋通络、活血去瘀、消肿止痛等功效。
颈腰康胶囊功能主治:舒筋活络,活血祛瘀,消肿止痛。颈腰康胶囊用于
骨折瘀血肿胀疼痛,骨折恢复期,以及肾虚挟瘀所致痹痛(增生性脊柱炎,腰椎间盘脱出症)。
为有效控制成品质量。选定颈腰康胶囊中君药制马钱子所含主要有效成分士的宁为定量指标。采用高效液相色谱法对于颈腰康胶囊中士的宁进行定量分析。该方法准确、专一,适用于该制剂的质量分析检验。
仪器:LC一10ATvp高效液相色谱仪(日本岛津);色谱工作站(大连化学物理研究所)。士的宁对照品购于中国药品生物制品检定所;水为超纯水;其余试剂均为分析纯。
色谱条件:色谱柱为Lun silsca(4.6 lnlll×250 lllln,5 pan);流动相为正己烷一二氯甲烷一甲醇一浓氨试液(42.5:42.5:5.4:0.35);检测波长为254 rim;温度为室温。
对照品溶液的配制:精密称取士的宁对照品适量,加醋酸乙酯制成每1 mL含试药 0.05 mg的溶液。
供试品溶液的制备:取于颈腰康胶囊,混匀,精密称定约0.6 g,加氯仿50 mL与浓氨试液1 mL称定重量.轻轻振摇,放置24 h,再称定重量,用氯仿补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25 mL,蒸干,残渣加醋酸乙酯溶解.转移至10 mL量瓶中,加醋酸乙酯至刻度,摇匀即可。
空白试验:取不含马钱子的阴性制剂,按1.5项下方法制成阴性对照溶液,按上述色谱条件测定。结果阴性对照溶液在与士的宁相同保留时间处无色谱峰出现线性关系考察:精密吸取浓度为0.054 2 mg/mL的士的宁对照品溶液1,3.5,10,20 ,按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积积分值为纵坐标,士的宁对照品进样量为横坐标,绘制标准曲线。其回归方程为A=5 875 944.168 C+51 716,r=0.999 8。结果表明,士的宁进样量在0.135 5—0.813 p-g范围内与峰面积呈良好的线性关系。
精密度试验:精密吸取同一供试品溶液5 L,连续进样5次,测得士的宁峰面积积分值,平均值为A=2 652 200,RSD=1.o4%(n=5)。
重现性试验:取批号为Ol1201的样品5份,按1.5项下方法测定,结果平均含量为0.48rag/粒,RSD=1.37% (n:5)。
回收率试验:取已知含量的颈腰康胶囊(批号:01 1201,含量为0.48 mg/粒) 5份,分别加人一定量的士的宁对照品,按1.5项下方法制备成供试品溶液,并按上述色谱条件测定,结果平均回收率为100.6% ,RSD:205% (n=5),
样品含量测定:取样品3批,按1.5项下方法制成供试品溶液,并按上述色谱条件测定,样品加溶剂冷浸24 h后,①滤过即得;②用硫酸溶液以游离生物碱形式提取的士的宁以盐的形式溶于水中,除去脂溶性杂质,再将酸性水溶液碱化用氯仿提取,除去水溶性杂质。经测定两种提取方法所获士的宁含量一致,但方法①操作简便,故采用此方法。
结论:高效液相色谱法简便、灵敏、准确,可用于颈腰康胶囊的质量控制。
参考文献:于文静,申玉华,王焕群,徐倩,刘瑞江 《高效液相色谱法测定颈腰康胶囊中士的宁的含量》 《中国药业》2003年第11期