类风湿性
关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性、对称性多滑膜关节炎和关节外病变(皮下结节、心包炎、胸膜炎、肺炎和周围神经炎等)为主 要临床表现的自身免疫炎性疾病。目前其病因及发病机制不明,但一般认为是感染引起遗传易感个体的自身免疫反应,与多种免疫细胞有关,尤其是CD4 T细胞。Thl7细胞是一群新发现的、以高分泌白介素(interleukin,IL)17为特征的CD4 T细胞,可表达IL一17A、IL一17F、1L-6和TNF-ot等炎性细胞因子,在抗胞外菌感染和介导慢性炎症、自身免疫病及
肿瘤等过程中发挥重要作用 J。研究发现,具有强大促炎效应的IL一17能够通过多种途径参与RA关节的慢性炎症和进行性损害 。CD4 CD25 调节性T细胞(regulatory T ceils,Treg cells)是一类特异表达转录因子Foxp3、具有免疫负性调节功能的CD4 T细胞,可通过细胞间接触抑制及分泌抑制性细胞因子(如IL一10、TGF—p)等途径发挥抗炎和维持自身免疫耐受的作用。转录因子Foxp3是表达于Treg细胞内的标记分子,对Treg细胞在胸腺内的发育、外周的分布以及抑制功能的维持具有重要作用。
研究对象:2OO9—03/2009—09在四川大学华西医院门诊部就诊的RA患者45例。
方法:细胞培养将采集的肝素钠抗凝全血用RPMI1640培养液按1:1的体积比稀释后,加入PMA(终浓度50 L)、离子霉素(终浓度1 mg/L)和莫能霉素(Monensin,1 rnI/L)并充分混匀,于37℃、50 mL/L CO:细胞培养箱中培养5 h,用于Thl7细胞的检测。
统计学分析:采用SPSS15.0统计软件对数据进行统计描述和分析。首先进行正态性检验,符合正态分布的数据以±s表示,两组间的比较采用t检验,多组间的比较采用方差分析,组间两两比较采用SNK法。非正态分布的数据,用中位数和四分位数间距表示。两组问的比较采用Mann.Whit-ney检验,多组问的比较采用Kruska1.Wallis H检验,组间两两比较采Nemen~法。P<0.05为差异具有统计学意义。
结果: RA患者外周血T细胞亚群分析与健康对照组比较,活动期和稳定期RA患者CD3 T细胞的比率无明显变化,CD3 CD4 T细胞的比率明显升高(P<0.05);而CD3 CD8T细胞的比率降低,但无统计学意义(P>0.05),故CIM/CD8T细胞的比值显著增高(JP<0.05)。活动期和稳定期RA患者组间不同T细胞亚群的比率以及CD4 /CD8 T细胞比值的差异均无统计学意义。
本研究中,我们发现,RA患者外周血中Thl7细胞的数量明显高于健康对照,且随着疾病活动性的增加Thl7细胞的数量升高,与Foxp3-CD4 CD25 效应性T细胞的变化较为一致。据此我们推测,Th17细胞可能作为一种主要的效应性T细胞,参与诱导了RA关节慢性炎症的发生发展,其数量的增加可致IL一17分泌增多,而IL-17则可通过刺激滑膜成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶(MMP).与IL-1B和TNF-oL协同诱导核因子一KB受体激活因子配体(receptor activator of NF—KB ligand,RANKL)及其受体RANK的活化等途径参与RA关节的骨质破坏及周围组织的炎性损伤,进而促进疾病的进一步恶化发展。
总之,本研究显示,随着疾病活动性的增加,RA患者外周血CD4 T细胞中Thl7细胞的比率增加而Foxp3 CD4 CD25 Treg细胞的比率降低,导致Thl7/Treg细胞的比例失衡,并且平衡向Thl7细胞一方偏移,提示RA患者外周血效应性T细胞的异常增加可能是CD4 T细胞亚群紊乱的原因之一。患者体内的免疫抑制效应减弱而免疫炎性效应增强,二者的共同作用可诱导外周血T细胞亚群的紊乱以及外周免疫耐受的破坏,进而促进疾病的发生发展。对Th17/Treg细胞平衡调控的深入研究,将可能为RA患者的治疗提供新的靶点。