益髓颗粒具有“益气养阴,活血止血”功效,作为医院制剂应 用已1 0 余年, 并证明能提升血小板数、缓解巨核系病态造血, 对骨髓增生异常综合征(MDS) 、免疫性血小板减少性紫癜(ITP) 有明显疗效。现综述如下。
1 益髓颗粒组方与功效
益髓颗粒是课题组提供的长期对难治血液病临床观察治疗过 程中拟定的有效方剂, 在总结临床研究资料基础上, 集中我院多位具有丰富临床经验医师用药体会, 经反复论证拟定, 并于 1990 年经北京市东城区卫生局批准为北京中医药大学东直门医院内 部使用制剂, 由院制剂室根据卫生局报批工艺, 加工制备成冲剂, 定名“益髓颗粒”。于 1992 年在北京市东城区卫生局备案(1998 年在北京市药政局) 作为医院制剂销售。
“益髓颗粒”由炙黄芪、党参各30g,生熟地、当归、阿胶各 10g,菟丝子、丹参、鸡血藤各 20g,桃仁、地龙各 10g,红花、蜈蚣各 6 g 组成。方中黄芪甘温, 为治诸气虚之要药,生熟地补阴养 血, 当归补血活血, 三药合用有益气养阴活血之功效, 在方中为君药;党参善补中气,以养后天,阿胶补肾益阴,丹参活血补血,在方中为臣药,以协助主药发挥益气养阴活血之功;鸡血藤、桃仁、红花、地龙为活血化瘀常用药物, 在方中为佐药以协助主药益气活血,治血瘀之标,菟丝子益肾阴,补肾阳,以阳护阴,蜈蚣虽为祛风镇痉之品, 但有攻毒散结之功, 与活血化瘀药物相互配伍可加重活血之力, 且蜈蚣又可引药通络, 促进气血运行。二药在方中亦为佐使药。综观全方, 诸药相互配合运用, 有益气养阴活血功效。临床用于治疗神疲懒言, 头晕乏力, 手足心热, 口千咽燥, 皮下瘀斑、瘀点, 月经增多, 并有血块, 或见症积、包块, 或见周身疼痛 (骨痛) ,舌淡暗或紫暗,脉细而数,或脉细而兼涩象,或结,或代,或无脉等气阴(血)两虚,血瘀内阻证候。本方体现了治本为主,标本兼治的中医总体治疗原则。另外, 方中蜈蚣虽有小毒, 但在方中 用量极小, 与大量补益药为伍, 可使毒性减低。通过临床观察表明, 治疗前后尿便常规, 肝、肾功能, 心电图检查均未见异常变化, 同时也未发现临床不良反应。目前, 益髓颗粒剂位于院内制 剂销售量前两名, 该药除满足了北京市场外, 也吸引了全国患者前来就诊, 具有一定临床基础。
2 实验研究
首先进行了益髓灵促进小鼠粒系造血的初步研究: 应用体外 骨髓培养等方法, 观察到益髓灵体内和体外用药能使 AMMS/5小鼠外周血白细胞数升高 29%~58%;使 CFU-GM 产率提高 2 9%~ 6 7 %, 并观察了用药途径、用药剂量和用药时间对实验结果的影响。选用巨核细胞白血病系 HI-Meg为靶细胞, 通过短期与较 长期液体培养, 观察中药益髓颗粒剂及其拆方对HI-Meg 细胞增殖与分化的影响, 结果发现益气养阴药对HI-Meg 细胞有较强的 促增殖作用; 活血解毒药既有抑制增殖又有促进分化作用, 但有 毒性; 而益髓颗粒剂复方则表现为明显的抑制增殖和促进分化双重作用, 而且无毒性反应。进而观察了益髓灵对白血病巨核细 胞系HI-Meg 增殖、分化以及基因表达影响: 证明益髓灵初提物 (YSL)对人类白血病巨核细胞HI-Meg 有明显的抑制增殖和促进其向成熟方向分化的双重作用,其有效浓度为 1∶1000。在其 基础上, 用 CDNA-mRNA 原位杂交技术观察到,HI-Meg 细胞被益 髓颗粒剂诱导分化后 LIF,myc 基因表达都有不同程度增强, 阳性反应主要定位于分化程度较高的巨核细胞内。并以HL60/K562 为靶细胞, 进一步研究了益髓灵不同提取物诱导其凋亡效应。结 果表明,益髓灵不同提取物均有诱导 HL60/K562 细胞凋亡作用,但 在作用程度和时间上有一些差别。其中益髓灵氯仿、乙酸乙脂提取物作用最好,正丁醇、水提取组分次之。含益髓灵氯仿提取物的兔血清与肝匀浆具有诱导 HL60 细胞凋亡的作用。其作用程度 与用药浓度成正相关性。证实了益髓灵复方或氯仿提取物中含有 诱导肿瘤细胞凋亡的活性物质。通过血清药理学方法, 观察益 髓灵兔药血清有较强的诱导 HL-60 细胞凋亡作用,以 10% 兔药血清作用 48h 效果最好,并发现其诱导凋亡机制与抑制 Bcl-2 基因 表达相关。认为: 益髓灵进入动物体内也有诱导白血病细胞凋亡作用。进一步研究, 益髓灵初提物和含益髓灵初提物的兔药血清均有较强诱导 HL-60 细胞凋亡作用,而对脐带血单个核细胞的 凋亡诱导作用较弱, 同浓度、同时间两种细胞凋亡作用比较, 有显著性差异。认为益髓灵具有选择性诱导白血病细胞凋亡作用, 其诱导白血病细胞凋亡是治疗恶性血液病的关键机制之一。
另外的研究提示,益髓灵能使小鼠脾细胞 IL-2 和 N K 细胞活 性增加, 并和用药浓度有一定的关系, 证明合适的用药浓度可能 对免疫机制有调节作用。还利用 WX-6 型多功能微循环显微镜 及 MCIP 图象处理系统, 观察了益髓灵对 MDS 患者球结膜微循环 影响。提示该药能使患者微细动脉血管内经增宽, 微血管血流速 度加快, 微细动脉血流量增加, 并有降低毛细血管渗透性, 促进渗 出吸收作用。
3 临床研究
首先对 1985~1993 年间收治的 MDS 患者 6 0 例系统总结,临 床显效率、总有效率分别为 6 2%、8 6%。经对其中 2 0 例 5 年以 上长期随访, 白血病转化率为 1 5 %。针对 MDS 现代医学尚无理 想治疗药物前提下, 在国内首先提出开展中医药治疗 MDS 临床研究新思路, 通过预临床研究, 肯定了中医药治疗 MDS 可行性与有 效性, 并在临床研究经验积累的基础上, 依据“益气养阴活血法” 拟定了“益髓灵”作为治疗 MDS 治疗方剂。进行随机对照试验, 治疗组 4 6 例,其中 RA34 例、RAS6 例、RAEB6 例;对照组 9 例, 其中 RA6 例、RAS1 例、RAEB2 例。2 组均符合中医气阴两虚、血瘀内阻证候。治疗组服用益髓颗粒剂每次 1 袋(9g),每日3 次; 对照组采用采用对症支持疗法,RAEB 采用小剂量阿糖胞苷治疗。 两组均以3个月为 1 疗程,疗程结束后,进行有关临床资料统计与 疗效评定。治疗组基本缓解 12 例,占 26%;明显进步 19 例,占 41%; 进步 12 例,占 26%;无效 3 例,占7%。对照组基本缓解 2 例,占22%; 明显进步 2 例,占22%;进步 2 例,占 22%;无效 3 例,占 33%。治疗组总有效率 93%,对照组总有效率 67%。治疗组 2 9 例患者长期随 访,白血病转化率为15%;对照组随访 6 例,分别于 2 4~4 2个月内 死于严重感染。该药疗效明显优于对照组, 明显降低白血病转化率,延长生存期。
经对经益髓灵治疗1个月后的 3 2 例 MDS 患者外周血淋巴细 胞 FCM 分析。治疗前后对比,G1 期淋巴细胞有所增加, S 、G2M 期淋巴细胞明显减少,经统计学处理,P<0.05 ,有显著性差异。实验结果提示, 益髓灵能明显减少MDS 患者外周血淋巴细胞的S 、G2M 期细胞百分比。推测机理可能与该药能提高机体抗病能力, 减少抗原对机体刺激, 抑制淋巴细胞转化, 阻止淋巴细胞重新进入细胞周期有一定关系。分析了益髓灵对 MDS 患者T 细胞亚 群的影响。结果显示服用益髓灵3个月后, 能够明显提高患者外周血 T 4 细胞数,降低 T 8 细胞数,调整 T4/T8 细胞比例,提示益髓灵对 MDS 患者机体免疫机制有调节作用[12]。
并针对 MDS 自然病程中, 由于白细胞减少, 极易发生细菌或病毒感染而造成临床死亡现象, 重点开展了益髓灵降低 MDS 患者感 染机率初步临床研究。通过对治疗初及治疗后年内感染率统计, 并对感染部位、感染性质及抗生素应用情况分析, 治疗组5 2例与对照组16 例比较,年内累计感染发生率分别为 46%(治疗组)与 100% (对照组) 。表明益髓灵有降低 MDS 患者临床感染机率和预防感染作用。还开展了益髓颗粒剂治疗巨核系病态造血的临床研究: 以骨髓巨核系病态造血性疾病 MDS 为研究对象, 治疗组 6 8 例, 对照组 3 0 例。通过临床观察, 能够明显改善患者临床主症与出血症状, 在提高患者外周血小板数量的同时, 对血红蛋白数值也有一定的提升作用。近期临床显效率 55.88%,总有效率 80.88%,与对照 组比较,P<0.01, 1,差异有显著性。最后详细讨论了益髓颗粒剂在 现代难治性血液病中的应用: 通过病症临床观察, 对特发性血小板减少性紫癜、难治性血小板减少症、再生障碍性贫血、化疗后骨髓抑制等显示的较好临床疗效及其作用机理。
4 研究展望
根据异病同治、同病异治中医理论, 许多血液病在发生与发 展过程中可出现气阴两虚、血瘀内阻的证候。虽然疾病病因不同, 但证候表现相同, 所以益髓颗粒剂可用于上述不同病证治疗。随着益髓颗粒的应用不断增多, 有必要进一步探索益髓颗粒作用 机理, 鉴于此我们全面开始进行一系列研究, 目前正在进行益髓 颗粒对ITP 动物模型免疫功能调节作用的研究。而且随着作用 机制的不断明确, 将来可以更多地应用在血液系统相关疾病中, 并且可为开发中药新药提供临床与基础研究资料。
参考文献:李冬云,马薇,荣秀梅,许亚梅,陈信义等.益髓颗粒组方分析及应用研究[J].中外医疗.2009(8):153-154