抗精子抗体是
男性不育的主要免疫因素之一,血清AsAb检测已在临床广泛开展,然而男性不育生殖道局部的抗精子反应已日渐引起人们的高度重视,且认为与精子结合的抗精子抗体比血清中对生育力影响更为重要[1]。本文对有精子凝集现象的男性不育患者同时检测血清及精子膜表面抗精子IgG型抗体,分析其阳性率,同时分析阳性组与对照组主要精液参数的差异。探讨混合凝集反应(MAR)检测精子膜表面的抗精子抗体的临床应用价值和利弊。
目的:探讨混合凝集反应(MAR)检测精子膜表面的抗精子抗体(AsAb)的临床应用价值、利弊。
方法:对85例有精子凝集现象的男性不育患者同时检测血清及精子膜表面抗精子IgG型抗体,分析其阳性率,同时分析阳性组与对照组主要精液参数的差异。
结果:不育血清AsAb阳性率为32.9%,MAR阳性率为7.06%,MAR阳性组各主要参数如精子活率、a+b级活力、密度均明显低于血清阳性组及正常对照组(P<0.05)。
结论:MAR检测精子膜表面的抗精子抗体更具临床意义,且特异性高、操作简单快捷。MAR试验可作为免疫性不育诊断的常规筛选方法。
1 材料和方法
1.1 检测对象
2005年11月至2007年3月来本院男科门诊就诊,诊断为不育男性(2 a不育,性生活正常,无遗传病史,女方无生育障碍),精液分析(CASA)中有精子凝集现象的患者85例,年龄23岁~35岁。对照组为正常男性20例(有生育史,身体健康,CASA正常),年龄25岁~34岁。
1.2 标本收集
禁欲3 d~7 d,用手淫法取精液于一次性专用取精杯中。置37℃水浴,液化后进行CASA分析,有精子凝集现象的患者,做MAR试验,同时采静脉血2 ml用于血清抗精子抗体的检测。
1.3 方法
CASA用北京中科精液计算机辅助分析系统(灰度法),按要求严格操作。MAR试验采用深圳华康生物有限公司生产的精子膜表面抗体(混合凝集反应)IgG检测试剂盒,按要求严格操作和结果判断。血清AsAb检测用德国SERATEC抗精子抗体检测试剂盒对血清进行抗精子抗体的IgG抗体检测。
1.4 统计学分析
用SPSS软件进行两组间的q检验。
2 结果
85例精子有凝集现象的患者中血清IgG型AsAb阳性有28例,阳性率为32.9%,MAR试验阳性6例,阳性率为7.06%。正常对照组、血清阳性组与MAR阳性组主要精液参数对比见表1。表1 各组间主要精液参数的比较(略)
表1结果表明,精液主要参数在正常组、血清阳性组及MAR阳性组中呈下降趋势,q检验显示MAR阳性组各主要参数均明显低于正常组和血清阳性组(P<0.05)。组间结果比较如下:精子活率、a+b级动力在各组间均有差异(P<0.05),精子密度在MAR阳性组与血清阳性组、MAR阳性组与正常对照组存在差异(P<0.05),血清阳性组与正常对照组间差异无显着性(P>0.05)。
3 讨论
正常情况下,由于血睾屏障的存在及体内免疫抑制因素,男性体内并不产生AsAb。在异常情况下,如
前列腺炎、精囊炎、附睾炎、睾丸炎等生殖道感染,输精管道的阻塞、损伤等情况下,机体的免疫屏障及其保护机制遭破坏,精子抗原直接与机体的免疫系统接触,引起免疫反应,从而在血清及精浆中出现AsAb,并导致生育能力低下或不育[2]。其干扰机制为:干扰精子的代谢活化;细胞毒作用杀死精子、凝集作用影响精子活动率,降低进入受精部位的精子数;妨碍精子获能过程干扰受精;抑制合子细胞分裂,引起精子发生过程的紊乱造成
少精或
无精症等等[3]。本文中精液各主要参数在不同组别间的变化也说明AsAb对精液质量的上述影响。
本文结果显示不育男性精子MAR阳性率仅为7.06%,远低于血清AsAb阳性率32.9% 。除了因男性血睾屏障的存在,血液中的精子抗体无法完全渗透到精液中去这一生理因素外。另一方法学原因是,血清抗精子抗体诊断试剂盒特异性较差。目前国内外所用血清抗精子抗体诊断抗原多直接从精子内获得,它同时包含精子膜抗原和大量精子膜内多达几十种的抗原物质(但尚不清楚引发免疫性不育最具特异性的抗原成分),这些提取抗原可与正常人血清存在交叉反应。尽管在制作工艺上可最大限度地减少这种假阳性结果,但其特异性仍存在较大疑问;而且血清试剂盒检测方法多采用 ELISA间接法,易造成假阳性[4]。所以在一定程度上造成血清阳性率高过MAR阳性率。
男性免疫性不育诊断的主要依据系证实射精精子表面抗体的附着。射精前抗精子抗体与精子表面的结合,是抗精子抗体干扰男性生殖的唯一途径,表1各精液主要参数的变化可以说明这一点。由于血睾屏障的存在,血清内抗精子抗体的存在无法真实反映当前生殖道内精子是否存在抗体;因此活体精子膜表面抗体检测对免疫性不育更具诊断价值。MAR检测标本为活力精子,可以对精子表面抗体产生部位进行定位;检测过程中能保持被检测精子膜的完整性,膜内抗原不对外释放,检测更具特异性;操作简单快捷。如果没有IgG抗精子抗体,IgA抗体几乎从不存在[4],因此MAR试验可作为精子膜表面抗体常规筛选方法。 但在应用过程中也要注意到阳性结果的判断会受某些特殊标本的影响,如一些少弱精症中,因精子活动率过于低下,会造成假阳性的出现,可以通过提取高活力精子等方法加以解决。
参考来源:《实用医技杂志》2007年9月14卷25期;《精子膜表面IgG型抗精子抗体的检测应用》;卢卫国