滑膜炎片是由丹参、川牛膝、防己、黄芪、夏枯草、女贞子、土茯苓等十三味中药组成的新药,有清热利湿、活血通络之功效,滑膜炎片用于急、慢性滑膜炎及膝关节术后的患者。本文对滑膜炎片质量标准进行了研究,对其中的丹参、川牛膝进行了薄层色谱鉴别,并采用HPLC法测定了原儿茶醛的含量。
薄层鉴别:丹参的鉴别取滑膜炎片5片,除去薄膜衣,研细,加5%碳酸氢钠溶液50 mL,超声处理30 min,离心,取上清液,用盐酸调节pH值至2~3,用乙醚振摇提取2次,每次30 mL,合并乙醚液,挥干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。取缺丹参的阴性样品,同法制成阴性对照溶液。另取丹参对照药材0.5 g,同法制成对照药材溶液。再取丹酚酸B对照品,加甲醇制成每1 mL含2 mg的溶液,作为对照品溶液。吸取上述溶液各5 L,分别点于同一硅胶GF: 薄层板上。
川牛膝的鉴别取滑膜炎片5片,除去薄膜衣,研细,加水50 mL,超声处理30 min,滤过,滤液用乙酸乙酯振摇提取2次,每次30 mL,合并乙酸乙酯液,挥干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。取缺川牛膝的阴性样品,同法制成阴性对照溶液。另取川牛膝对照药材1 g,同法制成对照药材溶液。吸取上述溶液各4 L,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯一三氯甲烷一丙酮(8:4:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性无干扰。
加样回收试验取已知含量的滑膜炎片5份,精密称定,分别精密加入原儿茶醛对照品适量,按“供试品溶液的制备”项下方法制备,按上述色谱条件测定。
滑膜炎片处方较大,最初采用水提醇沉工艺时,由于药物所含化学成分近似,如含大量有机酸及皂苷等,给薄层鉴别带来较大难度。针对丹参所含酚酸类成分的性质,本试验采取的纯化方法是先用5%碳酸氢钠溶液提取,然后酸化萃取,优于2005年版《中国药典》一部丹参的处理方法,可除去其他成分,薄层色谱清晰,阴性对照无干扰。2005年版《中国药典》一部中,川牛膝项下并未收载薄层鉴别方法。本文建立的川牛膝薄层鉴别方法简单,通用性强,可为相关鉴别提供参考。试验中,我们选用甲醇一水一冰醋酸(15:84:1)作为本品的流动相,出峰时间及分离度适宜;根据对提取方法及提取时问的考察,样品采用流动相作为提取溶剂,超声提取30 min为宜。采用本文方法,准确、灵敏、重现性好,可有效控制滑膜炎片质量。
(本文节选自《滑膜炎片的质量标准研究》)